مشروع تحليل RNA-seq لدراسة التغيرات الجينية الناتجة عن تنشيط مستقبل الأندروجين في خلايا سرطان البروستاتا بعد المعالجة بالأندروجين الصناعي R1881.
تم تنفيذ التحليل على خطي خلايا بشريين:
LNCaP
LAPC4
وتحت حالتين بيولوجيتين:
بدون علاج (Control)
بعد العلاج بالأندروجين (R1881 – 10 nM)
بإجمالي 11 عينة RNA-seq مع مكررات بيولوجية.خطوات التنفيذ
فحص جودة البيانات باستخدام FastQC
تنظيف البيانات وإزالة الـ adapters الخاصة بـ Illumina باستخدام Cutadapt
محاذاة القراءات إلى الجينوم البشري GRCh37 (hg19) باستخدام STAR
عدّ القراءات باستخدام FeatureCounts
تحليل التعبير الجيني التفاضلي باستخدام DESeq2
تحليل المسارات الحيوية باستخدام GSEA (MSigDB Hallmark
النتائج الرئيسية
تفعيل قوي لمسار HALLMARK_ANDROGEN_RESPONSE بعد العلاج
تنشيط مسارات مرتبطة بالنمو والانقسام الخلوي مثل:
mTORC1 signaling
E2F targets
MYC targets
رصد جينات رئيسية مستجيبة للأندروجين مثل:
FKBP5، KLK3، TMPRSS2، SGK1
تثبيط نسبي لمسارات EMT، مما يعكس طبيعة الاستجابة الهرمونية للخلايا