الخطوة 1: جمع البيانات
قمت بجمع تسلسلات الحمض النووي من الأنواع المستهدفة، Diplodus sargus و Diplodus vulgaris. لقد حصلت على هذه التسلسلات من قواعد بيانات الحمض النووي العامة مثل NCBI GenBank.
الخطوة 2: محاذاة التسلسلات
استخدمت برنامجًا مثل MUSCLE أو ClustalW لإجراء محاذاة متعددة للتسلسلات. تأكدت من أن التسلسلات محاذاة بشكل صحيح وأن المناطق المحافظة والمتغيرة موزعة بشكل مناسب.
الخطوة 3: تنقية المحاذاة
بعد المحاذاة، نظفت البيانات لإزالة المناطق غير المتناسقة أو ذات التغاير الشديد الذي يمكن أن يشوه التحليل الفيلوجيني.
الخطوة 4: اختيار النموذج الإحصائي
استخدمت برامج مثل DNAsp5 و Ugene لتحليل بياناتي.
الخطوة 5: بناء الشجرة
باستخدام النموذج الذي اخترته، قمت بتشغيل برنامج مثل MEGA، لبناء الشجرة الفيلوجينية. قد يتضمن هذا استخدام طرق مثل الحد الأقصى للمصداقية أو الجيران المتلاصقين.
الخطوة 6: تقييم دقة الشجرة
للتحقق من دقة الشجرة، أجريت تحليل Bootstrap أو تحليل الاحتمال المركب للتأكد من أن العقد قد تم دعمها بشكل كافٍ.
الخطوة 7: تحليل وتفسير النتائج
بعد تشكيل الشجرة، قمت بتفسير النتائج، ملاحظًا العلاقات بين الأنواع ومناقشة النتائج في سياق المعرفة البيولوجية الموجودة.
الخطوة 8: تحضير الرسم البياني
أخيرًا، استخدمت برنامجًا مثل FigTree أو أداة مماثلة لتنظيم الشجرة وتصميمها لتكون جاهزة للنشر، مما أتاح لي عرض العقد والتسلسلات بوضوح.